Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类(HEV)病du IgM抗tiELISA检测。

产品特点

一、高效、灵敏、特异的抗ti;

二、稳定的重复性和可靠性;

三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;

四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;

五、节省实验经费。

组成结构

1、血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。

2、血浆:EDTA、柠檬suan盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。

5、保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

试剂的准备

20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

自备材料

1.蒸馏水。

2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3.振荡器及磁力搅拌器等。

洗板方法

1.  手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。

2.  自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

操作步骤

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3.  样本孔先加待测样本10μL,再加样ben稀释ye40μL;空白孔不加。

4.  除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

安全性

1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

4.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

5.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

6.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

7.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

8.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

9.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

10.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有du。实验完成后应立即读取OD值。

11.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

12.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

免责声明

1.  试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。

2.  严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。

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