- 品牌:瑞清
- 产地:深圳
- 型号:0.2ml/200μg
- 货号:RQ-XG20133
- 价格: ¥2/毫克
- 发布日期: 2023-02-19
- 更新日期: 2024-12-16
产地 | 深圳 |
品牌 | 瑞清 |
保存条件 | |
货号 | RQ-XG20133 |
用途 | 科研实验 |
应用范围 | 详见说明书 |
抗原来源 | Rabbit |
保质期 | |
抗体名 | |
是否单克隆 | |
克隆性 | |
靶点 | |
适应物种 | 详见说明书 |
形态 | |
宿主 | |
标记物 | |
包装规格 | 0.2ml/200μg |
亚型 | |
标识物 | |
浓度 | % |
免疫原 | KLH conjugated synthetic peptide derived from human PLEKHM1 |
是否进口 | 否 |
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采血,家兔、山羊、绵羊可采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
注意事项:
1.请根据实验需要选择工作效价,部分实验根据具体实验情况可在推荐工作效价基础上进行增加或减小。
2.短期保存的抗体:如抗体几周内就会使用,收到后推荐在2-8℃保存,2-8℃短暂保存数周对抗体活性没有影响。
3.长期保存的抗体:如抗体需超过1个月后才会使用,请酌情分装后于-20℃保存。
4.建议:将抗体保存在冰箱里层,避免温度变化造成反复冻融。避免将抗体保存在自动除霜冰箱中。